江苏农业学报 /oa 南粳系列品种氮素利用效率初探 /oa/darticle.aspx?type=view&id=202205001 研究南粳系列品种产量及其构成因素对氮素的响应,为大面积绿色生产提供依据。以南粳系列7个粳稻品种为试验材料,研究4个氮肥水平[不施氮肥(N0:0 kg/hm2)、低氮(N1:150 kg/hm2)、中氮(N2:300 kg/hm2)、高氮(N3:450 kg/hm2)]对品种的影响。试验采用裂区设计,氮肥水平为主区,品种为裂区,3次重复,考察了剑叶性状、节间抗折力、产量及其构成因素对氮肥的响应及不同品种的氮肥利用特性。结果表明,施氮处理均提高了南粳系列品种的产量,7个品种呈不同程度的增产,增产范围从1.61 t/hm2到3.43 t/hm2,氮素偏生产力为59.61~66.61 kg/kg,氮素收获指数为60.29%~68.07%,氮素农学利用效率为9.82~18.98 kg/kg,氮素生理利用效率为41.31~58.20 kg/kg。南粳5818、南粳9036和南粳60为氮肥高效敏感型品种,南粳5818、南粳9036的氮肥贡献率、氮素农学利用效率较高,南粳60的氮素生理利用效率较高,这3个品种在生产中需要优化氮肥运筹方式以充分发挥氮肥的增产作用。对氮素反应较迟钝的品种,在生产中需要适当降低氮肥用量,进一步协调氮肥与产量的关系,以获得较高的氮肥利用率。在本研究中,南粳系列品种高产的关键是在稳定结实率和千粒质量的基础上,稳步提高群体颖花量。南粳5718和南粳9036高氮条件下具有较强的抗倒性,是江苏省高氮条件下种植水稻的良好选择。 2022年10月31 00:00 2022年05期 1153 1161 2039752 赵凌,张勇,朱镇,陈涛,赵庆勇,张亚东,王才林 外源硒、钙对优质食味粳稻产量、品质及稻米硒、钙含量的影响 /oa/darticle.aspx?type=view&id=202205002 本研究旨在探究叶面喷施外源硒钙制剂(氨基多糖硒钙水溶肥)对优质食味粳稻产量、品质和营养强化的影响。以优质食味粳稻南粳9108、南粳46、南粳2728、南粳505、淮稻5号和徐稻9号为研究材料,设置田间试验,在破口期喷施133 ml/L氨基多糖硒钙水溶肥(T),以喷施等量清水为对照(CK),成熟期测定水稻的产量及其构成因素、品质(外观品质、加工品质、营养品质、食味值)以及稻米中硒和钙的含量。方差分析结果表明,氨基多糖硒钙水溶肥可显著提高水稻每穗粒数和产量,平均增幅分别为10.01%和7.10%;对有的供试品种能改善粒型,提高整精米率,降低不完善粒率和黄米粒率;处理后垩白粒率和垩白度下降,平均降幅分别为23.03%和18.52%;米饭食味值显著提高,平均增幅为6.53%。此外,氨基多糖硒钙水溶肥处理对稻米中硒、钙具有营养强化的作用,大米中硒、钙含量平均增幅分别为357.01%和86.82%。显然,氨基多糖硒钙水溶肥对水稻产量、品质以及稻米中硒、钙营养强化具有良好的效果,具有一定的推广价值。本研究结果可以为水稻稻米中的硒、钙营养强化栽培提供理论和实践依据。 2022年10月31 00:00 2022年05期 1162 1170 1415096 魏杰,吴传万,尹航,张豪杰,文章荣,邵青,陈紫岩,章安康,彭杰,杜小凤 基于表型性状和KASP标记的玉米DUS测试品种的聚类分析 /oa/darticle.aspx?type=view&id=202205003 为探讨竞争性等位基因特异性PCR(KASP)标记在玉米DUS(特异性、一致性和稳定性)测试过程中近似品种筛选方面的应用,采用表型和KASP标记对玉米测试品种进行聚类分析。表型的二阶聚类结果显示,315份玉米品种可划分为普通型、甜质型以及糯质型和甜糯混合型3类,“籽粒:类型”性状对聚类结果的影响最大;系统聚类结果显示,单交种和自交系间的分离比较明显,普通型玉米与甜质型、糯质型、甜糯混合型玉米间的分离也较明显,甜质型、糯质型、甜糯混合型玉米三者之间的分离不明显。KASP标记聚类结果显示,自交系与单交种交织在一起,普通型玉米与甜质型、糯质型、甜糯混合型玉米间明显分离,甜质型玉米与糯质型、甜糯混合型玉米间的分离也较明显,糯质型玉米和甜糯混合型玉米相互交织。综上分析可知,在繁殖类型上单交种和自交系表型聚类结果与KASP标记聚类结果不同,而在籽粒类型上2种聚类结果基本吻合。 2022年10月31 00:00 2022年05期 1171 1178 1842994 王艳平,潘红,吴燕,王显生,汪鸿星,李华勇,于堃,沈奇 绿豆Alfin1-like基因家族的鉴定与干旱胁迫下的表达分析 /oa/darticle.aspx?type=view&id=202205004 Alfin1-like(AL)转录因子家族在对非生物胁迫的反应中具有重要调控作用。为了探究绿豆[Vigna radiata (L.)Wilczek] AL基因家族成员在干旱胁迫下的表达情况,本研究在前期以苏绿1号为试验材料完成全基因组测序和盐胁迫下转录组测序的基础上,采用同源比对的方法鉴定绿豆AL转录因子(VrAL)家族基因,分析其生物学特性;用1/2浓度Hoagland营养液培养绿豆幼苗,对照组(CK)无聚乙二醇(PEG 6000)、处理组含有20% PEG 6000,采用qRT-PCR方法探索VrAL基因家族成员在干旱胁迫下基因表达的差异。结果表明:(1)共鉴定到10个VrAL基因,根据其在染色体上的位置依次命名为VrAL1~VrAL10,其编码区长度范围为717~765 bp。(2)10个VrAL基因均含有4个内含子和5个外显子,其中8个VrAL基因的启动子区域存在抗逆和植物激素响应元件。(3)qRT-PCR分析结果表明,处理组根中VrAL1、VrAL5、VrAL7和VrAL9上调表达,叶中VrAL8、VrAL9和VrAL10上调表达,它们在绿豆对干旱胁迫响应中发挥了重要的作用。 2022年10月31 00:00 2022年05期 1179 1187 2477051 周旭旭<sup>1,2</sup>,刘金洋<sup>2</sup>,陈新<sup>2</sup>,薛晨晨<sup>2</sup>,陈景斌<sup>2</sup>,林云<sup>2</sup>,闫强<sup>2</sup>,吴然然<sup>2</sup>,朱月林<sup>1</sup>,袁星星<sup>2</sup> 多枝柽柳叶片响应NaCl胁迫的转录组分析 /oa/darticle.aspx?type=view&id=202205005 在转录组层面解析盐生植物多枝柽柳响应盐胁迫的分子机制,为进一步挖掘耐盐关键基因提供参考。用200 mmol/L NaCl处理多枝柽柳0 h、48 h、168 h后,采集叶片进行转录组测序,分析差异表达基因(DEGs)并进行qRT-PCR验证。转录组测序原始数据拼接出Unigenes 105 702个,同时在KEGG、KOG、NR和SwissProt 4大功能数据库中检索到注释的Unigenes为27 670个。NaCl胁迫处理48 h后,多枝柽柳叶片中6 374个基因的表达水平上调,5 380个基因的表达水平下调;NaCl胁迫处理168 h后,叶片中有3 837个基因的表达水平上调,7 808个基因的表达水平下调。根据注释到KEGG 通路中的DEGs,筛选获得8个表达差异极其显著的DEGs,主要编码WRKY和bZIP家族转录因子。此外,由KEGG通路分析可知,MAPK信号转导途径可能参与多枝柽柳生长发育及其对NaCl胁迫的应答反应。本研究通过测定和解析在高盐胁迫下多枝柽柳叶片转录组信息,揭示了盐胁迫激活MAPK信号转导途径以及WRKY、MYB和bZIP等转录因子参与耐盐调控过程,为进一步研究多枝柽柳耐盐分子机制奠定了基础。 2022年10月31 00:00 2022年05期 1188 1202 2759981 陈亚辉<sup>1</sup>,张师瑒<sup>2</sup>,杨庆山<sup>3</sup>,宋志忠<sup>4</sup>,姜姜<sup>1</sup> 江苏蚕豆三叶草黄脉病毒的分子鉴定及全基因组结构特征分析 /oa/darticle.aspx?type=view&id=202205006 三叶草黄脉病毒(Clover yellow vein virus, ClYVV)是马铃薯Y病毒属的重要成员,侵染多种豆科作物并造成严重危害。为明确从江苏省盐城市采集的蚕豆样品中检测出的ClYVV全基因组序列以及基因组结构特征,通过分段扩增的策略对ClYVV全基因组序列进行克隆,序列测定后拼接获得江苏蚕豆三叶草黄脉病毒(ClYVV-JS)全基因组序列。基因组序列分析结果显示该分离物基因组序列全长9 585 bp,编码11个蛋白质。NCBI序列比对结果表明该分离物与已报道的日本ClYVV No.30分离物(AB011819)核苷酸序列同源性最高,达96.37%,其中编码的氨基酸序列同源性高达99.06%,而与中国合肥ClYVV分离物(KU922565)核苷酸序列同源性相对较低(94.74%)。聚类分析结果也显示ClYVV-JS归入三叶草黄脉病毒分支,与马铃薯Y病毒属其他成员分别归入不同分支。 2022年10月31 00:00 2022年05期 1203 1210 1652825 高晓晓<sup>1,2</sup>,涂丽琴<sup>2</sup>,孙枫<sup>2</sup>,李硕<sup>2</sup>,崔晓艳<sup>3</sup>,陈新<sup>3</sup>,章松柏<sup>1</sup>,季英华<sup>2</sup> 水肥耦合对稻田氨挥发及水稻产量的影响 /oa/darticle.aspx?type=view&id=202205007 水分、施肥管理是减少稻田氨挥发损失的重要农业管理措施,然而目前关于水肥耦合对于稻田氮素气态损失影响的研究还较少。本研究采用常规灌溉(W1:干湿交替灌溉)、节水灌溉(W2:全生育期湿润无明水)与不同施氮量(N1:常规施氮,353.86 kg/hm2;N2:减施20%氮肥,283.09 kg/hm2)相互耦合, 设W1N1、W1N2、W2N1和W2N2共4个处理,通过盆栽试验对水稻不同生育期的氨挥发通量、土壤铵态氮含量以及水稻产量进行观测。结果表明,W1N1、W1N2、W2N1、W2N2的氨挥发总量分别为66.07 kg/hm2、47.70 kg/hm2、43.45 kg/hm2、34.42 kg/hm2。相同施氮量下,节水灌溉可降低27.84%~34.24%的总氨挥发累积量,其中在基肥施用后和分蘖肥施用后可分别降低8.00%~61.40%和47.03%~76.82%的稻田氨挥发。在节水灌溉条件下,减施20.00%氮肥处理可减少20.78%的总氨挥发累积量。此外,W1N2、W2N2处理的氨挥发累积量及单位产量氨挥发量表现出较低水平,说明减氮耦合常规灌溉或者节水灌溉处理均可对稻田氨挥发起到很好的缓解作用。结构方程模型分析结果也表明,氮肥施用量是直接影响稻田氨挥发量的重要因素,从而间接影响水稻产量。但是,W2N1、W2N2处理均存在引起水稻显著减产和籽粒含氮量降低的风险。综合考虑各处理对减少氨挥发损失和水稻稳产的影响,本研究中干湿交替灌溉耦合减氮处理(W1N2)是一种较高效的稻田水肥管理方式。 2022年10月31 00:00 2022年05期 1211 1219 1321904 卢昕宇<sup>1,2</sup>,陈丹艳<sup>3</sup>,宁运旺<sup>2</sup>,张辉<sup>2</sup>,汪吉东<sup>2</sup>,冯渊圆<sup>2</sup>,邵孝候<sup>1</sup>,张永春<sup>2</sup> 播期、播种量及施氮量对宁麦资518生长发育及产量和籽粒品质的影响 /oa/darticle.aspx?type=view&id=202205008 为明确小麦新品种宁麦资518的优质高产栽培技术,采用裂区试验设计,研究播期、播种量和施氮量对其生长发育及产量、品质的影响。结果表明:播期对各生育期的生长发育指标、产量及籽粒品质的影响均达显著水平,播期越早,群体生育指标、产量越高,籽粒品质指标随播期推迟显著或不显著增加;群体生长发育指标(群体茎蘖数、叶面积指数和干物质积累量)及产量均随播种量增加而显著增加,在播种量为187.50 kg/hm2达最高值;籽粒品质指标随播种量增加逐渐降低,播种量最低时,蛋白质含量和湿面筋含量最高;随着施氮量增加,生长发育指标及产量整体表现为增加趋势,在施氮量为300.00 kg/hm2时,可获得最大的群体生长发育指标及产量,该施氮水平下的籽粒蛋白质和湿面筋含量可达中强筋小麦水平。综合分析可知,在本试验条件下,宁麦资518播期在11月1日左右、播种量187.50 kg/hm2、纯氮用量为300.00 kg/hm2时,可以获得较高的产量和优良的品质。 2022年10月31 00:00 2022年05期 1220 1226 1089940 张巧凤<sup>1</sup>,周冬冬<sup>2</sup>,付必胜<sup>1</sup>,翟文玲<sup>1</sup>,吴小有<sup>1</sup>,吴纪中<sup>1</sup> 播期和密度对冬小麦开花后干物质转运及灌浆特征参数的影响 /oa/darticle.aspx?type=view&id=202205009 以周麦22为试验材料,采用裂区试验,研究播期(B1:10月5日; B2:10月10日; B3:10月15日; B4:10月20日)和播种密度(M1:1 hm21.2×106株; M2:1 hm22.7×106株; M3:1 hm24.2×106株)对籽粒灌浆和物质转运的影响。结果表明,(1)播期和播量均对灌浆特征参数产生显著影响,播期主要影响灌浆速率,而密度主要影响灌浆持续时间。(2)冬小麦花后干物质积累动态符合一元三次多项式Y=b+b1x+b2x2+b3x3(Y为营养器官干物质质量,b、b1、b2、b3为系数,x为开花后天数),开花后8~10 d植株营养器官干物质积累量达到最大值;播期提前可显著提高冬小麦单株干物质积累量,但随种植密度增加,冬小麦单株干物质积累量则迅速降低。(3)开花后冬小麦营养器官干物质转运量对籽粒产量的贡献率为43.07%~70.11%。渐增期籽粒灌浆以光合作用产物为主,快增期、缓增期籽粒灌浆养分来源以营养器官干物质转运为主。播期主要影响灌浆速率、最大灌浆达到时间、快增期持续时间和缓增期持续时间;密度主要影响千粒质量、总灌浆持续时间、渐增期持续时间和各时期籽粒增质量;播期和密度互作效应主要影响平均灌浆速率和渐增期持续时间。 2022年10月31 00:00 2022年05期 1227 1237 1896575 刘红杰<sup>1</sup>,任德超<sup>1</sup>,倪永静<sup>1</sup>,张素瑜<sup>1</sup>,王艳敏<sup>1</sup>,葛君<sup>1</sup>,吕国华<sup>2</sup>,胡新<sup>1</sup>,孙凤岭<sup>1</sup>,陈玉霞<sup>3</sup> 农林废弃物堆肥产物复配黄瓜育苗基质配方筛选 /oa/darticle.aspx?type=view&id=202205010 以农林废弃物为主要堆肥原料,设置正常通气量<br />[10.0 L/(m3·min)]和低通气量<br />[2.5 L/(m3·min)] 2种方式,进行为期5个月的堆肥试验,并将发酵4个月和5个月的堆肥产物分别用于复配制备育苗基质进行黄瓜育苗试验。结果表明,正常通气量堆体最高温度和高温时间均大于低通气量堆体,有机质降解程度更高。发酵5个月后,低通气量堆肥产物中铵态氮、硝态氮、总钾含量分别比正常通气堆肥高68.7%、8.2%、38.3%,总氮、总磷含量分别比正常通气量堆肥低6.7%、15.6%。堆肥产物复配菜园土后的基质pH、电导率(EC值)、总养分含量和速效养分含量比单纯堆肥低,但容重增加。主成分分析结果表明,复配基质中堆肥产物添加比例越高,基质综合性能越好;发酵5个月的堆肥产物复配基质优于发酵4个月堆肥产物复配基质。好氧发酵产物与菜园土按3∶1体积比配比对黄瓜育苗效果较好,可作为其穴盘育苗的推荐配方。降低堆肥通风量制备的堆肥产物可以获得与正常通风水平下的堆肥产物及商品基质同等育苗效果。 2022年10月31 00:00 2022年05期 1238 1247 1208591 古君禹<sup>1,2</sup>,王秋君<sup>1,3,4</sup>,孙倩<sup>1,3,4</sup>,张晶<sup>1,3,4</sup>,陈豹<sup>1,2</sup>,成立<sup>5</sup>,曹云<sup>1,2,3,4</sup>,黄红英<sup>1,3,4</sup> 不同邻苯二甲酸二丁酯污染方式对其降解和土壤细菌群落的影响 /oa/darticle.aspx?type=view&id=202205011 为准确评估邻苯二甲酸二丁酯(DBP)污染对土壤环境的影响,对比研究不同DBP污染方式[高剂量(20 mg/kg)单次污染处理(S处理)、低剂量(1 mg/kg)累积污染(每7 d污染1次,连续污染20次)处理(R处理)、CK(无污染母土)]对DBP降解及土壤细菌群落的影响。结果表明,土壤细菌群落的α多样性对不同DBP污染方式的响应较不敏感;2种污染方式均显著改变了土壤细菌群落的β多样性,S处理对红壤细菌群落结构的影响较大,R处理对黄棕壤细菌群落结构的影响较大;在2种污染方式处理下,红壤、黄棕壤中部分具有氮素转化、有机物分解、拮抗病原菌和植物促生等重要功能的细菌群落产生了显著扰动;此外,2种污染方式均显著提高了土壤对DBP的降解能力,与S处理相比,R处理的红壤、黄棕壤中DBP的降解半衰期分别缩短了77.18%、28.57%,表明低剂量累积污染处理方式对土壤中DBP的降解有更强的促进作用。 2022年10月31 00:00 2022年05期 1248 1256 1465917 程金金<sup>1,2</sup>,孙星<sup>1,2</sup>,田莉莉<sup>1,2</sup>,王亚<sup>1,2</sup>,余向阳<sup>1,2</sup> 基于决策树的大尺度复杂地区夏收作物遥感提取与分析 /oa/darticle.aspx?type=view&id=202205012 以甘肃省为研究区,基于时序Sentinel-2卫星影像数据,计算归一化植被指数(NDVI)和黄度值,采用决策树(Decision trees,DTs)方法提取研究区的主要夏收作物小麦和油菜种植面积,并对比分析其精度。利用此方法得到甘肃省小麦和油菜作物识别的平均总体精度达到87.4%,其中,甘肃省中部地区平均总体精度为92.4%,河西地区平均总体精度为87.7%,东南部地区平均总体精度为82.0%。研究结果表明,基于Sentinel-2卫星影像数据采用决策树方法进行大尺度复杂区域、高分辨率作物种植面积提取具有可行性。 2022年10月31 00:00 2022年05期 1257 1264 2234933 李亚妮<sup>1,2,3</sup>,曹建君<sup>1,4</sup>,杨树文<sup>1,2,3</sup>,李霞<sup>5</sup>,刘尚钦<sup>1,2,3</sup> 基于层次贝叶斯法的高山松生物量估测模型 /oa/darticle.aspx?type=view&id=202205013 为研究层次贝叶斯法在高山松单木及不同组分生物量模型中的运用,基于香格里拉市Ⅰ区和Ⅱ区共115株高山松天然林数据,分别利用层次贝叶斯法与非层次贝叶斯法拟合高山松单木及各组分异速生物量模型,最后使用十折交叉方法进行模型精度验证。结果表明:(1)层次贝叶斯法拟合模型的效果优于非层次贝叶斯法,利用层次贝叶斯法拟合单木及不同组分生物量模型的决定系数(R2)精度提高区间为[0.000 1,0.012 0],均方根误差(RMSE)降低区间为[0.03 kg,8.94 kg],平均绝对误差(MAD)降低区间为[0.03 kg,3.31 kg]。(2)对比层次与非层次贝叶斯法拟合单木及不同组分生物量模型的结果发现,树干生物量、木材生物量和单木生物量模型效果最优,树皮生物量、树冠生物量和树枝生物量模型效果较优,树叶生物量模型效果较差。层次贝叶斯法拟合的R2区间为[0.365 0,0.965 0],非层次贝叶斯法拟合的R2区间为[0.437 0,0.964 7]。与非层次贝叶斯法相比,层次贝叶斯法可以有效提高生物量模型的估测精度(树枝与树叶除外),且这2种方法均可使用传统方法的估测结果作为先验信息,更新模型的参数值,提高建模灵活性。 2022年10月31 00:00 2022年05期 1265 1271 1109245 黄金君<sup>1,2</sup>,舒清态<sup>2</sup>,席磊<sup>2</sup>,孙杨<sup>2</sup>,刘玥伶<sup>2</sup> 猪CD205分子CysR-FN Ⅱ截短基因的克隆表达及应用 /oa/darticle.aspx?type=view&id=202205014 为克隆表达编码猪CD205分子的CysR-FN Ⅱ截短基因片段,并验证其生物学活性,提取了猪淋巴组织总RNA,并合成cDNA,利用PCR方法扩增编码猪CD205分子的CysR-FN Ⅱ截短基因,构建pET-32a-CysR-FN Ⅱ原核重组表达质粒,转化至大肠杆菌BL21,分别进行诱导表达与蛋白质纯化,利用制备的目的蛋白免疫小鼠获得多克隆抗体,经间接免疫荧光试验和流式细胞分析鉴定。SDS-PAGE与Western Blot鉴定结果显示,目的蛋白以可溶性形式表达,大小约4.0×104,与理论值一致。一次免疫后14 d抗体效价达1∶3 200。间接免疫荧光试验和流式分析结果显示,获得的多克隆抗体可与猪骨髓来源树突状细胞发生特异性结合。说明该重组表达蛋白质具有相应的生物学活性,可用于猪CD205抗原靶向研究。 2022年10月31 00:00 2022年05期 1272 1277 1469113 高文昊<sup>1,2</sup>,杜露平<sup>1,3</sup>,侯立婷<sup>1,3</sup>,于晓明<sup>1,3</sup>,陈瑾<sup>1,3</sup>,冯秀丽<sup>2</sup>,郑其升<sup>1,3</sup>,程海卫<sup>1,3</sup> 热应激通过钙信号调控湖羊卵巢颗粒细胞凋亡和雌激素合成 /oa/darticle.aspx?type=view&id=202205015 热应激严重影响动物的繁殖性能,但热应激是如何通过调控绵羊卵巢颗粒细胞功能进而调控绵羊繁殖的相关研究较少。本研究以湖羊卵巢颗粒细胞为研究对象,利用Real-time PCR、流式细胞技术、Western blot、ELISA等方法探讨热应激对湖羊卵巢颗粒细胞钙信号通路、细胞凋亡和雌激素合成的影响。结果表明,热应激后,湖羊卵巢颗粒细胞中钙离子浓度显著上升(P<0.05),钙离子信号通路中相关基因CACNA1B、CACNA1C、RYR1、CAMK2表达量显著升高,线粒体分裂蛋白FIS1表达量显著上升,促凋亡蛋白家族代表基因BAX和抗凋亡蛋白代表基因BCL2 mRNA表达量比值(BAX/BCL2)显著上升,细胞凋亡率增加;雌二醇合成关键酶CYP19A1表达量显著下调,雌二醇含量显著下降(P<0.05)。热应激卵巢颗粒细胞中加入钙离子螯合剂(BAPTA-AM)明显降低钙离子浓度,同时减少细胞凋亡,缓解热应激造成的卵巢颗粒细胞雌二醇含量下调。综上表明,热应激打开了湖羊卵巢颗粒细胞膜电压门控钙离子通道和内质网膜上钙离子释放通道,导致细胞质中钙离子浓度上升,促进卵巢颗粒细胞凋亡,引起雌二醇含量下调。 2022年10月31 00:00 2022年05期 1278 1285 2032084 李樊<sup>1,2,3</sup>,李隐侠<sup>1,2,3</sup>,舒嘉傲<sup>1,2,3</sup>,孟春花<sup>1,2,3</sup>,张俊<sup>1,2,3</sup>,钱勇<sup>1,2,3</sup>,曹少先<sup>1,2,3</sup> 1α羟化酶的真核表达和生物信息学特征及其在成年肉鸡组织中的差异表达 /oa/darticle.aspx?type=view&id=202205016 旨在构建1羟化酶(CYP27C1)真核表达载体,在293T细胞中重组表达CYP27C1-mycHis,探究cyp27c1基因在成年鸡不同组织中的表达水平,明确1α-羟化酶三级结构特征、与底物识别和活性中心底物结合相关的关键氨基酸。将合成的cyp27c1的开放阅读框(ORF)插入pMD18-T质粒,并将该质粒命名为pMD-cyp27c1。以改造后的质粒为模板,通过PCR扩增cyp27c1 ORF,将其插入pcDNATM3.1,构建真核表达载体pcDNA-cyp27c1。然后分别用pcDNA-cyp27c1及空载体pcDNA瞬时转染293T细胞,48 h后收集细胞,提取线粒体,用Bradford法测定蛋白质的质量浓度。1 μg线粒体用于12%聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分离,以myc抗体作为一抗检测重组CYP27C1在293T细胞中的表达水平。利用实时荧光定量PCR检测cyp27c1在成年鸡组织中的表达水平。通过生物信息学分析CYP27C1的理化特性,并预测其亚细胞定位,利用同源建模、多序列同源比对和分子对接法研究CYP27C1的空间结构特征以及与底物(25-OH D3)结合和识别相关的关键氨基酸。测序结果显示,1 608 bp编码区插入到pcDNATM3.1,并成功在其3′端融合了载体表达标签myc-His。在重组表达CYP27C1-mycHis的293T细胞线粒体中检测到相对分子质量为58 000的特异性条带。实时荧光定量PCR结果表明,cyp27c1基因在鸡肝、肾、胸肌、腿肌、小肠、胸腺、脾、肾上腺、睾丸、卵巢等组织中均有表达,并且相对表达量存在组织差异性。cyp27c1基因编码1个由536个氨基酸组成的细胞色素P450,亚细胞定位于线粒体上,成熟蛋白质N-末端起始于V62。同源建模结果显示,CYP27C1中α螺旋、β折叠的氨基酸数量分别占蛋白质中总氨基酸数量的49.15%、5.90%,具有与其他线粒体细胞色素P450相似的开放式三级结构。多序列比对和分子对接结果表明,C482、R135与血红素形成较强的氢键;A136、K83是与25-OH D3识别的关键氨基酸;活性中心L343、D347是与25-OH D3结合的关键氨基酸。本研究成功构建了CYP27C1真核表达载体,并在293T细胞中超表达CYP27C1,确定了CYP27C1的三级结构和与底物识别及结合相关的关键氨基酸,为后续深入研究CYP27C1结构、功能和催化机制提供了基础。 2022年10月31 00:00 2022年05期 1286 1297 5246903 尚书凤<sup>1</sup>,赵小龙<sup>2</sup>,杨书洋<sup>1</sup>,郭素芬<sup>1</sup>,樊阔<sup>1</sup>,李天<sup>1</sup>,王琦<sup>1</sup> 血清4型禽腺病毒POCT荧光微球免疫层析检测方法的建立 /oa/darticle.aspx?type=view&id=202205017 为了迅速且便利地判定血清4型禽腺病毒(FAdV-4),设计引物进行扩增,构建重组载体,原核表达的融合蛋白乳化后动物免疫得到多克隆抗体,用Western Blot检测,最后建立即时检验(POCT)荧光微球免疫层析试纸条,并进行初步应用。用POCT荧光微球免疫层析试纸条检测不同浓度的FAdV-4病毒液及临床阳性样本,结果表明,用POCT荧光微球免疫层析试纸条15 min可以检测出结果,且检测出阳性,与临床诊断结果相符。建立的POCT荧光微球免疫层析检测FAdV-4的方法,特异性良好,操作简单且便于携带,检测效率高,有利于基层兽医临床检测。 2022年10月31 00:00 2022年05期 1298 1305 1987393 邵颖<sup>1,2</sup>,肖福泉<sup>1,2</sup>,王丽丽<sup>1,2</sup>,龚柳菲<sup>1,2</sup>,宋祥军<sup>1,2</sup>,涂健<sup>1,2</sup>,祁克宗<sup>1,2</sup> 羊瘤胃液中产阿魏酸酯酶乳酸菌的筛选及对水稻秸秆青贮品质的影响 /oa/darticle.aspx?type=view&id=202205018 为了进一步降解水稻秸秆青贮饲料中的纤维,提高青贮饲料品质,从湖羊瘤胃液中筛选产阿魏酸酯酶的乳酸菌,鉴定菌株特性,并将其接种到水稻秸秆青贮中,研究其对青贮水稻秸秆纤维降解率和化学成分的影响。结果表明,从湖羊瘤胃液中共筛选出2株高产阿魏酸酯酶的乳酸菌,菌株SR1与鼠李糖乳杆菌的同源性最高,SR2与香肠乳杆菌的同源性最高;SR2的产酸速度比SR1快,培养24 h后培养液的pH值为3.83;2株乳酸菌在pH值4.0~7.0、温度25~37 ℃、3.0% NaCl条件下的生长状况良好,都能利用多种糖源物质。与CK相比,接种菌株SR2组的水稻秸秆青贮饲料中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维和纤维素含量均显著降低(P&lt;0.05),而接种菌株SR1对水稻秸秆青贮饲料纤维含量的影响不大;接种菌株SR2组的水稻秸秆青贮饲料pH值、铵态氮含量最低,乳酸含量最高。综上,香肠乳杆菌SR2可作为水稻秸秆青贮的备选菌株。 2022年10月31 00:00 2022年05期 1306 1314 1250847 刘蓓一<sup>1,2</sup>,韦青<sup>1,2</sup>,田吉鹏<sup>1,2</sup>,程云辉<sup>1,2</sup>,许能祥<sup>1,2</sup>,张文洁<sup>1,2</sup>,顾洪如<sup>1,2</sup>,路庆鹏<sup>3</sup>,刘翔<sup>4</sup>,丁成龙<sup>1,2</sup> 白菜型冬油菜NAC基因家族鉴定及表达分析 /oa/darticle.aspx?type=view&id=202205019 NAC(NAM、ATAF1/2、CUC2)是植物特有的一类转录因子基因家族,其家族成员在参与响应低温、干旱等非生物胁迫过程发挥重要作用。本研究基于白菜型冬油菜陇油7号全基因组测序结果,共鉴定出119个NAC家族成员,系统进化结果显示,所有NAC转录因子基因聚类为8个亚族,在10条染色体上呈不均匀分布;BraNAC蛋白在细胞核、细胞质、叶绿体、线粒体等细胞器中都有分布;启动子作用元件分析结果显示,BraNAC家族成员广泛参与低温胁迫响应、干旱胁迫响应、机械损伤响应、胚胎发育和内源激素调控等进程;对BraNAC基因在低温胁迫下白菜型冬油菜生长锥中的表达预测结果表明,大部分BraNAC基因通过上调表达使白菜型冬油菜适应低温环境。在低温和干旱胁迫下,选择11个BraNAC基因在2个耐寒性不同的白菜型冬油菜品种的幼苗中进行表达分析,发现BraNAC家族基因受不同逆境胁迫诱导,并且在不同处理时间与植物不同组织中存在表达特异性。本研究扩展了植物NAC基因家族成员信息,为鉴定和筛选抗逆基因提供参考。 2022年10月31 00:00 2022年05期 1315 1329 5343723 王会文<sup>1,2</sup>,范军强<sup>1,2</sup>,路晓明<sup>1,2</sup>,曾瑞<sup>1,2</sup>,武军艳<sup>1,2</sup>,刘丽君<sup>2</sup>,马骊<sup>2</sup>,蒲媛媛<sup>1,2</sup>,孙万仓<sup>1,2</sup>,李学才<sup>1,2</sup> 叶用莴苣种质资源表型性状及营养品质综合评价 /oa/darticle.aspx?type=view&id=202205020 利用表型性状综合评价、营养成分综合评价、主成分分析和聚类分析等方法,对叶用莴苣种质资源10个农艺性状及6个营养成分进行了系统分析。结果表明:(1)叶用莴苣种质资源各性状之间变异系数存在较大差异,变异系数范围为17.94%~91.86%。13份叶用莴苣种质资源的多样性指数变化范围为1.38~1.99,叶长的多样性指数最高;(2)通过聚类分析将13份叶用莴苣种质资源分为5个类群。(3)采用主成分分析的方法,从16项基本指标中提取出产量、营养成分主成分因子,可代表叶用莴苣95.44%的信息量。综合评价结果表明:各优质种质资源综合得分范围为-2.07~3.65,综合得分排名较高的4个种质依次为普希金(3.65)&gt;超级意大利(3.47)&gt;绿雅(2.75)&gt;京研意大利(1.98)。 2022年10月31 00:00 2022年05期 1330 1339 1351430 田雪珂,钟启文,孙雪梅,张广楠,杨世鹏,谭龙,王丽慧 番茄根系分泌物苹果酸和丁香酸对土壤细菌群落结构和潜在功能的影响 /oa/darticle.aspx?type=view&id=202205021 苹果酸、丁香酸是番茄根系分泌物的重要组分,将苹果酸、丁香酸作为外源物持续添加到黄瓜田、番茄田土壤中,并通过定量PCR、扩增子高通量测序及功能预测手段探究苹果酸、丁香酸对土壤细菌群落结构及其潜在功能的影响。结果表明,与对照相比,添加外源丁香酸能显著降低土壤细菌总量,降幅达50.57%~56.38%,而苹果酸的影响不显著。添加外源苹果酸、丁香酸可明显改变土壤细菌群落组成,可解释26.53%的细菌群落变异,苹果酸在黄瓜田、番茄田土壤中均富集假诺卡氏菌属(Pseudonocardia)细菌,而丁香酸均富集Aridibacter。此外,添加外源苹果酸能显著提高细菌群落对短链有机酸的降解能力,而添加外源丁香酸可显著降低细菌形成生物膜的能力并提高芳香族化合物的降解能力,但上述作用与土地利用方式有关。 2022年10月31 00:00 2022年05期 1340 1347 1852996 严文辉<sup>1</sup>,李志丹<sup>1</sup>,邓逐流<sup>2</sup>,谢忱<sup>2</sup>,谷益安<sup>2</sup>,雷鹏<sup>2</sup>,王瑞<sup>2</sup>,李莎<sup>2</sup>,徐虹<sup>2</sup> 基于KASP技术的SNP标记用于西瓜品种指纹图谱构建和种子纯度检测 /oa/darticle.aspx?type=view&id=202205022 随着SNP标记在育种工作中的应用,KASP技术因其低成本、高通量、高准确性等优势,在作物指纹图谱构建及种子纯度检测等方面具有很高的应用价值。已报道的西瓜品种分子鉴定和指纹图谱多采用SSR标记,试验过程较为繁琐,效率较低。本研究利用32对核心SNP标记,采用KASP技术对54份包括野生型、东亚型和美洲型等不同农艺性状的西瓜自交系材料和25份西瓜杂交种进行了基因分型,明确了自交系材料之间遗传距离和遗传背景,为西瓜育种提供了方向,并构建了苏梦和苏创系列西瓜品种的指纹图谱。从32对引物中筛选出的2对引物可用于苏梦5号、苏梦6号、苏梦7号、苏梦9号、苏创3号、苏创4号和苏创5号的种子纯度检测,这为西瓜品种及种子纯度鉴定提供了简便、快捷、高效的方法。 2022年10月31 00:00 2022年05期 1348 1356 1365287 刘欣,程瑞,徐兵划,白甜,许文钊,张朝阳,罗德旭,赵建锋,张兴平,孙玉东 上海温州蜜柑叶片营养诊断及优化施肥策略 /oa/darticle.aspx?type=view&id=202205023 以上海市崇明区70个代表性温州蜜柑果园为研究对象,根据叶片DRIS、M-DRIS、DOP诊断法和边界线方法,对果园进行叶片矿质养分含量的测定及营养平衡诊断,为温州蜜柑丰产优质科学施肥提供依据。结果显示:(1)高产园和低产园间叶片中大多矿质养分含量差异不显著,低产园叶片矿质养分含量变异范围高于高产园;(2)应用边界线方法确定温州蜜柑叶片矿质养分的适宜范围为N 2.80%~3.10%、P2O5 0.17%~0.23%、K2O 0.71%~1.50%、Ca 3.40~4.80 g/kg、Mg 0.30~0.50 g/kg、Fe 89.00~129.00 mg/kg、Mn 21.00~63.00 mg/kg、Cu 5.00~12.00 mg/kg、Zn 11.00~20.00 mg/kg、B 33.00~101.00 mg/kg ;(3)DRIS、M-DRIS和DOP方法建立的养分平衡值(NBIm)与产量呈显著负相关,说明养分之间的平衡性是产量的主要限制因素。不同诊断方法推荐的养分平衡调节优先序基本一致,其中DRIS法和M-DRIS法建立的养分平衡调节优先序均为:Mn&gt;K&gt;Zn;可见,DOP法建立的养分平衡优先序为:Mn&gt;K&gt;N。可见,上海市温州蜜柑果园树体内各矿质元素间比例平衡关系对产量的影响更为显著,应采用叶片营养平衡诊断方法,制定更精准的施肥方案。 2022年10月31 00:00 2022年05期 1357 1365 1435351 丰智松<sup>1</sup>,李增源<sup>1</sup>,张卫峰<sup>1</sup>,陈磊<sup>2</sup>,安琪琪<sup>3</sup> 常见非洲菊品种生长习性与栽培 /oa/darticle.aspx?type=view&id=202205024 为摸清目前主流非洲菊品种的生长与栽培特性,以12种市场常见非洲菊品种为对象展开研究。结果显示,非洲菊各品种间株型、叶形、花序直径、小花大小存在极显著差异,花梗长度和花梗粗度无显著差异;国内非洲菊以黑色花心、花色明艳的半重瓣品种居多。不同地区间设施栽培的同一非洲菊品种观赏性状较稳定,但在切花花梗长度与产花量上存在显著差异。非洲菊的花梗长度与采收前7 d内最高温度、最低温度呈极显著负相关,与日温差呈极显著正相关,建议通过控制大棚日温差来提高切花花梗长度。湖北地区栽培的非洲菊秋季产花量高,生产上可优先考虑综合性状较好的热带草原、香槟、玲珑、云南红、水粉、白马王子和蜜糖等品种。 2022年10月31 00:00 2022年05期 1366 1373 1242906 过聪<sup>1</sup>,袁斌<sup>2</sup>,陈锋<sup>1</sup>,吕博<sup>1</sup>,孟庆忠<sup>1</sup>,向发云<sup>1</sup> 替代补偿、有效市场对果菜农有机肥替代化肥行为的影响 /oa/darticle.aspx?type=view&id=202205025 为了进一步减少中国化肥的施用,加快有机肥替代化肥政策的有效实施,推进绿色可持续农业的发展,本研究利用595份山东省果菜农调研数据,采用二元Logistic回归模型探究替代补偿、有效市场与果菜农有机肥替代化肥行为之间的关系。有机认证补偿、有机肥使用补偿、有机肥替代技术支持对果菜农有机肥替代化肥行为均有着显著的正向影响,有效市场对果菜农有机肥替代化肥行为具有显著的正向影响。同时,农户的年龄、受教育程度、有机肥政策了解程度、农技指导员、有机肥受益人也会影响到果菜农有机肥替代化肥行为。政府若想进一步推广有机肥替代化肥的政策,除了从政府支持的角度出发,还应加大有机肥作用的宣传,提高有机农产品的市场有效性,保证有机农产品能够实现优质优价,从而提升果菜农实施有机肥替代化肥的积极性。 2022年10月31 00:00 2022年05期 1374 1381 1192372 姜立康,周霞 土地流转对农户增收效应的影响——基于CHFS数据实证分析 /oa/darticle.aspx?type=view&id=202205026 为了验证土地租赁市场对促进农户收入公平、实现共同富裕的成效,基于2015年中国家庭金融调查(CHFS)数据,首先运用内生转换(ESR)模型研究了土地流转对农户家庭平均收入的影响,其次运用无条件分位数处理效应(UQTE)模型和广义分位数回归(GQR)模型,分析了土地流转对分布在不同收入水平上的农户人均收入效应差异。研究结果表明,农村土地流转能够显著提高参与土地流转农民的家庭人均收入;如果未参与土地流转的农户能够参与土地流转,其家庭人均收入可以得到大幅提高。此外,土地流转对低收入水平农户的增收效应更加明显,对不同收入水平农户的收入效应呈U型变化趋势且区域差异明显, 与东、中部地区相比,西部地区土地流转对高收入农户的收入效应相对较小。总之,农村土地流转有助于缩小农户人均收入差距,在一定程度上促进了农村社会公平和共同富裕。 2022年10月31 00:00 2022年05期 1382 1391 1175512 吴笑语,蒋远胜 无偿转入农地对保护性耕作技术采纳的影响 /oa/darticle.aspx?type=view&id=202205027 基于2020年中国土地经济调查(CLES)在江苏省调查的527个地块尺度数据,运用负二项回归、泊松内生处理效应模型(ETPR)和内生转换模型(ESR),验证无偿转入农地对转入方采纳保护性耕作技术行为的影响。结果显示:1)相比于有偿转入农地的转入方,无偿流转不利于转入方采纳测土配方施肥等4种保护性耕作技术,二者相比,无偿流转的转入方的总体技术采纳数量减少了1.356个,替换因变量的检验结果证实这一结果是稳健的。2)对不同类型技术的异质性分析结果表明,无偿流转的转入方对施用高效低毒低残留农药这一劳动节约型保护性耕作技术的采纳数量减少了0.183个,对测土配方施肥等3类劳动密集型耕作技术的采纳数量则减少了2.496个,无偿流转对转入方采纳劳动密集型保护性耕作技术的抑制作用更强。因此,应通过持续推进新一轮农地确权和加快完善流转中介服务平台,逐渐改变当前流转弱市场化的交易格局;应根据各地流转市场化程度的差异,因地制宜地推广不同劳动力属性的保护性耕作技术;同时结合技术的应用特点,对农户进行宣传和培训,开展高水平农田建设。 2022年10月31 00:00 2022年05期 1392 1401 1142507 陈甲<sup>1</sup>,徐静文<sup>2</sup>,吉星<sup>1</sup>,张红霄<sup>1</sup> 水稻白叶枯病抗性相关基因的研究进展 /oa/darticle.aspx?type=view&id=202205028 水稻白叶枯病是一种由革兰氏阴性黄单胞菌稻致病变种(Xanthomonas oryzae pv. oryzae,Xoo)引起的细菌性病害,是中国南方稻区常年发生的流行性病害。长期的生产实践证明,挖掘新型抗病基因以及合理利用新的广谱持久抗病品种是防控水稻白叶枯病最为经济、有效和环境友好的途径。阐明水稻对白叶枯病菌的防御机制能为水稻抗病育种奠定理论基础。本文简要概述了水稻白叶枯病的发生和现状,归纳了水稻主效抗病基因、抗病相关基因和感病基因的类型,总结了水稻抵御水稻白叶枯病病原细菌的主要途径,为水稻白叶枯病的绿色防控提供理论依据。 2022年10月31 00:00 2022年05期 1402 1410 1168600 陈贤<sup>1</sup>,赵延存<sup>1</sup>,明亮<sup>1</sup>,杨勇<sup>2</sup>,刘凤权<sup>1</sup> 植物SWEET基因家族促进病害发生的研究进展 /oa/darticle.aspx?type=view&id=202205029 糖的运输和分配在调节植物的生长发育和应对生物和非生物胁迫中起着关键作用。在植物-病原菌相互作用过程中,存在着对糖的竞争,这种竞争由膜运输体控制且对植物和病原互作的结果具有决定性作用。SWEET糖转运蛋白是细胞外病原菌的靶向目标,病原菌通过修改其表达水平以获得生长所需的糖分营养。本文阐述了植物中SWEET家族的分布和结构,归纳总结了SWEET在细菌、真菌和卵菌入侵寄主植物过程中所扮演的角色,最后展望了通过基因工程手段操纵SWEET基因的表达对于开发抗病栽培品种的前景。 2022年10月31 00:00 2022年05期 1411 1420 2569832 沈川<sup>1</sup>,李夏<sup>2</sup> 畜禽舍颗粒物排放特征及控制技术与装备 /oa/darticle.aspx?type=view&id=202205030 畜禽养殖舍是重要的颗粒物排放源,了解畜禽舍颗粒物的排放特性及其控制技术对于畜禽健康生产和环境健康均具有重要意义。本文综述了国内外主要畜禽舍颗粒物质量浓度分布规律和排放特征,总结了畜禽养殖设施颗粒物控制技术与装备研究发展现状,分析了不同控制技术的主要特征及颗粒物去除效率,对于了解不同畜禽饲养系统颗粒物排放特征,选择最佳的颗粒物控制技术措施具有重要参考意义。 2022年10月31 00:00 2022年05期 1421 1431 1644387 周忠凯,霍连飞,王慧鑫,汤赤,孟力力,柏宗春 带花斑现代月季育种研究进展 /oa/darticle.aspx?type=view&id=202205031 月季是重要的观赏花卉之一,全世界月季品种已超过35 000个,而带花斑月季品种在近几年才在国内兴起,因此关于其育成品种的相关报道较少。带花斑月季的花朵中心有固定形态的色斑,且色斑区颜色深于非色斑区,具有花量多、花期长、色彩组合丰富、可重复盛开等优点,并且花色随时间的推进而逐渐发生由深到浅的改变。由此可见,带花斑月季作为一类新颖的种质资源,具有很高的开发研究价值。本文通过搜索国内外各大网站,统计目前世界范围内带花斑月季品种,共收集83个品种的育种信息,将收集的信息制作为图、表,绘制以主要品种为亲本的育成品种系谱图,并按照时间节点介绍国内外带花斑月季品种的育种历程,以全面总结带花斑月季品种的育种成果。此外,本文对带花斑月季育种的发展方向进行了展望。 2022年10月31 00:00 2022年05期 1432 1440 3314130 刘鑫颖,冯策婷,杨晨,高金琰,罗乐,潘会堂,张启翔,于超