[1]王怡雯,齐颖颖,张红星,等.福氏志贺氏菌2a单克隆抗体的制备及ELISA方法的建立[J].江苏农业学报,2017,(02):450-455.[doi:doi:10.3969/j.issn.1000-4440.2017.02.033]
　WANG Yi-wen,QI Ying-ying,ZHANG Hong-xing,et al.Preparation of Shigella flexneri 2a monoclonal antibodies and establishment of ELISA for its detection[J].,2017,(02):450-455.[doi:doi:10.3969/j.issn.1000-4440.2017.02.033]
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福氏志贺氏菌2a单克隆抗体的制备及ELISA方法的建立()
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江苏农业学报[ISSN:1006-6977/CN:61-1281/TN]

卷:
期数:
2017年02期
页码:
450-455
栏目:
加工贮藏·质量安全
出版日期:
2017-04-30

文章信息/Info

Title:
Preparation of Shigella flexneri 2a monoclonal antibodies and establishment of ELISA for its detection
作者:
王怡雯; 齐颖颖; 张红星; 张帅; 谢远红; 刘慧
（食品质量与安全北京实验室/农产品有害微生物及农残安全检测与控制北京市重点实验室/北京市食品安全免疫快速检测工程技术研究中心/微生态制剂关键技术开发北京市工程实验室/北京农学院食品科学与工程学院,北京102206）
Author(s):
WANG Yi-wen; QI Ying-ying; ZHANG Hong-xing; ZHANG Shuai; XIE Yuan-hong; LIU Hui
(Beijing Laboratory of Food Quality and Safety/Beijing Key Laboratory of Agricultural Product Detection and Control for Spoilage Organisms and Pesticide/Beijing Engineering Technology Research Center of Food Safety Immune Rapid Detection/Beijing Engineering Laboratory of Key Technology Development of Microecologics/College of Food Science and Engineering，Beijing University of Agriculture，Beijing 102206， China)
关键词:
福氏志贺氏菌2a; 单克隆抗体; 杂交瘤; 双抗夹心ELISA
Keywords:
Shigella flexneri 2a; monoclonal antibody; hybridoma; sandwich ELISA
分类号:
R378.2+5
DOI:
doi:10.3969/j.issn.1000-4440.2017.02.033
文献标志码:
A
摘要:
为制备特异性和灵敏度较高的抗福氏志贺氏菌2a单克隆抗体，并建立双抗夹心酶联免疫吸附检测法，用于检测生鲜食品中的福氏志贺氏菌2a。本研究利用自制的福氏志贺氏菌2a抗原免疫BALB/c小鼠，并用杂交瘤技术进行细胞融合，经筛选克隆后，获得3株分泌抗福氏志贺氏菌2a单克隆抗体稳定的杂交瘤细胞，分别命名为5C12、1B5和6A11。3株杂交瘤细胞注射进小鼠腹腔后，诱导产生的腹水中抗体的效价为 1∶2.048×105～1∶1.024×105，免疫球蛋白亚型均为IgG。3株抗体识别抗原表位的最佳配对为5C12和6A11，由此建立双抗夹心ELISA体系，测得其灵敏度为1 000 CFU/g，且具有良好的特异性。
Abstract:
Preparation of specific and highly sensitive Shigella flexneri 2a monoclonal antibodies. The enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) was developed for the detection of Shigella flexneri 2a in food. In this study, BALB/c mice were immunized with Shigella flexneri 2a antigen. Hybridization techniques were used for cell fusion. After screening and cloning, three hybridoma cells lines, 5C12, 1B5 and 6A11, were obtained secreting monoclonal antibodies against S. flexneri 2a stably. Three hybridoma cells were named. The hybridoma cells was injected into the abdominal cavity of mice, and the induced antibodies titers were 1∶1.024×105、1∶1.024×105 and 1∶2.048×105. Their immune globulin subtypes were IgG. The best pairing of three antibodies was 5C12 and 6A11. The sandwich ELISA system established afterwards was good in sensitivity and specificity.

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备注/Memo

备注/Memo:
收稿日期：2016-11-11 基金项目：北京市属高等学校高层次人才引进与培养长城学者计划项目（CIT&TCD20140315）；北京农学院协同创新建设项目 作者简介：王怡雯（1992-），女，北京大兴人，硕士研究生，主要从事食品安全快速检测研究。（E-mail）791096628@qq.com 通讯作者：张红星，（E-mail）hxzhang511@163.com
更新日期/Last Update: 2017-05-02