[1]胡成,朱善元,左伟勇,等.鸭I型肝炎病毒一步法RT-LAMP可视化快速检测方法的建立[J].江苏农业学报,2015,(03):613-618.[doi:10.3969/j.issn.1000-4440.2015.03.024]
　HU Cheng,ZHU Shan-yuan,ZUO Wei-yong,et al.Development of an one-step reverse transcription loop-mediated isothermal amplification fast assay for visualized detection of duck hepatitis virus type I[J].,2015,(03):613-618.[doi:10.3969/j.issn.1000-4440.2015.03.024]
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鸭I型肝炎病毒一步法RT-LAMP可视化快速检测方法的建立()
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江苏农业学报[ISSN:1006-6977/CN:61-1281/TN]

卷:
期数:
2015年03期
页码:
613-618
栏目:
畜牧兽医·水产养殖
出版日期:
2015-06-30

文章信息/Info

Title:
Development of an one-step reverse transcription loop-mediated isothermal amplification fast assay for visualized detection of duck hepatitis virus type I
作者:
胡成1; 朱善元2; 左伟勇2; 王安平2; 吴双2; 洪伟鸣2; 成大荣1; 马丽丽3; 王永娟2
（1.扬州大学兽医学院，江苏扬州225009；2.江苏农牧科技职业学院，江苏泰州225300；3.甘肃农业大学动物医学院，甘肃兰州730070）
Author(s):
HU Cheng1; ZHU Shan-yuan2; ZUO Wei-yong2; WANG An-ping2; WU Shuang2; HONG Wei-ming2; CHENG Da-rong1; MA Li-li3; WANG Yong-juan2
（1.College of Veterinary Medicine，Yangzhou University，Yangzhou 225009，China；2.Jiangsu Animal Husbandry and Veterinary College，Taizhou 225300，China；3.College of Veterinary Medicine，Agricultural University of Gansu，Lanzhou 730070，China）
关键词:
鸭I型肝炎病毒; 环介导等温扩增; 可视化检测
Keywords:
duck hepatitis virus type I; reverse transcription loop-mediated isothermal amplification(RT-LAMP); visualized detection
分类号:
S834
DOI:
10.3969/j.issn.1000-4440.2015.03.024
文献标志码:
A
摘要:
本研究根据GenBank中登录的鸭I型肝炎病毒（DHV I）VP1基因的高度保守序列，设计了特异性的引物，建立了一种灵敏、特异、高效的可视化体外环介导等温扩增方法（RT-LAMP）。结果表明，该方法的灵敏性可达到10 fg，是常规一步法RT-PCR方法的100倍以上。全部反应可以在1.0～1.5 h内完成，并可以直接通过肉眼观察颜色进行结果判定，该方法对其他鸭常见的病原体检测结果全部为阴性，该方法的建立为下一步研制鸭I型肝炎病毒的RT-LAMP快速检测试剂盒打下基础。
Abstract:
Based on the sequences of duck hepatitis virus type I (DHV I) VP1 gene available in GenBank, a series of specific primers were designed and reverse transcription loop-mediated isothermal amplification (RT-LAMP) was developed for visualized detection of DHV I .The results showed that the detection limit of the DHV I by RT-LAMP was 10 fg, 100 time higher than that by normal one-step RT-PCR. The amplification could be finished within 1.0-1.5 h evaluated by naked eyes. The RT-LAMP developed in this study was specific and had no cross-reactivity with other pathogens of duck, laying a foundation for the development of RT-LAMP-based rapid detection kit.

参考文献/References:


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备注/Memo

备注/Memo:
收稿日期：2014-10-24 基金项目：国家自然科学基金项目（31302096）；江苏省博士后科研资助计划（1401077B）；江苏农牧科技学院“凤凰人才工程”项目；江苏农牧科技职业学院2014年度重点支持项目（NSFZD1405）；扬州朝天歌农牧科技有限公司横向合作课题（00010114012）；江苏省兽用生物制药高技术研究重点实验室开放课题（JSKLKF1403） 作者简介：胡成（1989-），男，江苏徐州人，硕士研究生，主要从事预防兽医微生物学研究。 通讯作者：王永娟，（E-mail） 43088591@qq.com
更新日期/Last Update: 2015-06-30